Isolierung und Strukturaufklärung

Die Isolierung eines Pilzinhaltsstoffes in analysenreiner Form bedarf eines sehr aufwendigen Verfahrens.

Am Anfang steht die Extraktion des zerkleinerten Pilzes mit einem geeigneten Lösungsmittel (meist Methanol), gefolgt von der Aufteilung des Rohextrakts in verschieden polare Fraktionen, die dann einzeln von unbrauchbarem Material (z. B. Zucker) befreit werden.

Anschließend erfolgt die Auftrennung einer Fraktion durch mehrfach aufeinanderfolgende Säulen- chromatographie und die Aufreinigung ihrer Bestandteile durch HPLC.

Zur Strukturaufklärung stehen dann meist nur wenige Milligramm Reinsubstanz zur Verfügung, die dann über HRMS und verschiedene 1D- und 2D-NMR-Experimente untersucht werden.

Auf diese Weise konnten unter anderem die Strukturen der komplexen Naturstoffe Stephanosporin, Necatoron und Tridentochinon aufgeklärt werden.

Stephanosporin	Necatoron	Tridentochinon